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細胞檢測試劑如何進行收集、保存及處理

細胞檢測試劑被應(yīng)用于定量活細胞的的細胞數(shù)量，其中基于熒光素酶（Luciferase）的冷光細胞活力檢測系統(tǒng)以其高靈敏度、高穩(wěn)定性被廣泛用于各種活細胞的檢測及藥物篩選。檢測試劑采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗，往預(yù)先包被SRB捕獲抗體的包被微孔中，依次加入檢測抗體，經(jīng)過溫育并清洗。用底物TMB著色，TMB會在過氧化物酶的作用下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的SRB呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，計算樣品濃度。細胞檢測試劑的樣品收集、...

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抗體套裝第一彈

雙十一活動火熱開啟，各種折扣福利享不停！為了助力細胞學(xué)的研究，索萊寶不僅有精心繪制的細胞信號通路圖，還篩選出了可用于檢測重要靶點蛋白的抗體套裝。瞧，細胞自噬抗體套裝，它來了！細胞自噬是目前生物、醫(yī)學(xué)等科研領(lǐng)域的研究熱點之一，參與各種生理和病理過程。下面讓我們一起來看看吧！什么是細胞自噬？細胞自噬（Autophagy）也稱為Ⅱ型細胞死亡，該過程由自噬相關(guān)基因(Autophagyrelatedgene，Atg)的調(diào)控，利用溶酶體降解自身受損的細胞器以及大分子物質(zhì)，是真核生物中進化...

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免疫學(xué)產(chǎn)品ELISA終止液的相關(guān)知識普及

免疫學(xué)產(chǎn)品ELISA終止液是一種主要用于ELISA等實驗中TMB顯色反應(yīng)終止的比較安全的不含硫酸的即用型酸性溶液。加入本產(chǎn)品后，TMB顯色反應(yīng)會被終止，并且原來的藍色溶液會并轉(zhuǎn)變成在450nm處有較強光吸收的黃色溶液，從而在450nm測定吸光度并且可以使檢測靈敏度比檢測藍色吸光度提高1倍左右。本產(chǎn)品相對比較安全，但由于其腐蝕性*而有較大的安全隱患。本產(chǎn)品不含硫酸，使用了相對更加安全的適當中強酸，可以有效避免硫酸的強腐蝕性可能對人體造成的傷害。需要注意的是本產(chǎn)品作為中強酸，雖然...

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PCR定量試劑盒進行引物探針確定的指標分析

PCR定量試劑盒前期的驗證引物探針性能和確定適反應(yīng)條件是確保正式實驗順利進行的前提。那么前期驗證引物探針我們需要怎么確定呢？主要指標是基線、擴增曲線、Ct值、擴增效率、低濃度樣本檢出、CV等。一、基線基線是PCR擴增曲線中水平的線，在PCR擴增反應(yīng)的循環(huán)中，熒光信號變化不大，成一條直線，這條直線即基線。在PCR定量試劑盒引物探針篩選時，要注意基線是否水平。引物探針濃度純度都會影響基線，如導(dǎo)致基線上抬，下降等。而基線也是一個很直觀的指標。二、擴增曲線另一個直觀地指標是擴增曲線形...

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記住這些知識點，你能也操作FITC熒光標記抗體

FITC熒光標記抗體是目前較為常用的標記抗體的方法，F(xiàn)ITC一般呈黃色、褐色或褐黃色粉末或結(jié)晶，性質(zhì)穩(wěn)定在低溫中能保存數(shù)年。在堿性條件下，F(xiàn)ITC的碳酰胺鍵可與抗體蛋白上的賴氨酸氨基共價結(jié)合，形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物，即熒光抗體或熒光結(jié)合物。一個抗體分子上能標記15~20個FITC分子，被標記的抗體仍能保持與相應(yīng)抗原結(jié)合的能力，在熒光燈源紫外線或藍紫光激發(fā)下產(chǎn)生黃綠色熒光，通過熒光顯微鏡進行觀察或利用流式細胞儀分析，從而對抗原進行定性、定位或定量。下面就跟隨小編一起來了解其...

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操作需謹慎，WB實驗時需要注意這些！

WB實驗，蛋白質(zhì)印跡又稱免疫印跡，是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。實驗原理：一個基因表達結(jié)果是產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)(或酶)。因此，檢測蛋白質(zhì)是測定基因表達的主要標志，檢測蛋白質(zhì)的方法很多，除ELISA法外，也可用與檢測DNA和RNA相類似的吸印方法。而樣本制備是WB實驗的開始也是重要的一步，它的操作雖然并不復(fù)雜，卻有很多需要注意的細節(jié)。根據(jù)實驗需要的目標蛋白的不同，大致可以分為三種：總蛋白、膜蛋白和核蛋...

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白細胞稀釋液的操作過程

白細胞稀釋液是一種應(yīng)用在血液檢測過程中的試劑，白細胞稀釋液是一種具有酸堿緩沖作用、恰當?shù)碾x子強度和電導(dǎo)率的電解質(zhì)平衡液。當用于稀釋待測血樣時，其適當?shù)碾x子強度能再一定時間內(nèi)完整地保持血細胞原來的體積，而其合適的電導(dǎo)率能保證獲得與細胞體積相應(yīng)的脈沖大小，保證測量結(jié)果準確。采用的原理是將血液用稀釋液作定量稀釋后，紅細胞*溶解，注入計數(shù)池在顯微鏡下計數(shù)，然后計算出血液中白細胞數(shù)。白細胞稀釋液的操作過程：1、小試管1支，加白細胞稀釋液0.38ml。2、用微量吸管準確吸取末稍血20μl...

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堿性固綠染色液的使用步驟

不同的氨基酸帶有不同化學(xué)性質(zhì)的側(cè)鏈基團，有的帶有堿性側(cè)鏈，有的帶有酸性側(cè)鏈，由此組成的蛋白質(zhì)具有不同數(shù)目的堿性基團和酸性基團，這些基團會使蛋白質(zhì)在不同的pH溶液中帶有不同的凈電荷，整個蛋白質(zhì)分子帶正電荷多，即為堿性蛋白。堿性固綠染色液是利用堿性蛋白質(zhì)與帶有負電荷的堿性染料固綠結(jié)合進行染色，細胞中含量最為豐富的堿性蛋白為組蛋白，主要存在于細胞核中，因此染色后細胞核大部分被染成綠色。使用步驟：1.取新鮮血液1滴滴于載玻片一端，推片，室溫晾干。2.涂片浸入70%乙醇中固定5min，...

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