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2016-56
2016-56
MTT全稱為3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromide，又稱噻唑藍。用于細胞增殖及細胞活性測定和對體外細胞的細胞毒性的測定。MTT的原理檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臢（Z?。‵ormazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲臢（Z?。?，用酶標儀在490nm波長處(英文說明書寫的是570nm）測定其...
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要知道MTT法檢測細胞活性步驟先要知道MTT是什么？MTTMTT是一種粉末狀化學試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，漢語化學名為3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細胞活性原理檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此...
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瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳常見為題都有哪些？、一、DNA帶模糊、1、DNA降解：瓊脂糖凝膠電泳試驗中要避免核酸酶污染2、電泳緩沖液陳舊：電泳緩沖液多系使用后，離子強度降解，PH值上升，緩沖能力減弱，從而影響電泳實驗，建議經(jīng)常更換電泳緩沖液。3、所用電泳條件不合適：電泳時電壓不應超過20V/cm，溫度4、DNA上揚量過多：應減少凝膠中DNA上樣量。...
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2016-54
瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。在瓊脂糖凝膠電泳緩沖液又幾種適用于天然雙鏈DNA的電泳。瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配置常見瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配制（如圖）TBE通常作為5×或10×的貯存液配制和貯存。這種濃的貯存液pH應為8.3左右，它在應用前稀釋，并用同一種貯存液制備凝膠溶液和瓊脂糖凝膠電泳緩沖液。上述三種電泳緩沖液都比較好...
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聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE（Polyacrylamide?gel?electrophoresis）聚丙烯酰氨凝膠電泳，是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術。聚丙烯酰胺凝膠由單體丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成，聚合過程由自由基催化完成。聚丙烯酰胺凝膠電泳作用：用于分離蛋白質和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝膠電泳原理：常用的催化聚合方法有兩種：化學聚合和光聚合。化學聚合通常是加入催化劑過硫酸銨（AP）以及加速劑四甲基乙二胺（TEMED），四甲基乙二胺催化過硫酸銨產生自...
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MRS培養(yǎng)基常用于食品中乳酸菌總數(shù)測定，自然pH通常是6.2—6.4，在做乳酸菌分離的時候直接使用自然pH就可以了，如果是做純培養(yǎng)，希望得到交好的菌落，或者是做液體培養(yǎng)，希望得到較多菌體的話，就把pH跳到6.7左右為佳。MRS培養(yǎng)基的原理蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子；葡萄糖為可發(fā)酵糖類；磷酸氫二鉀為酸堿緩沖劑；檸檬酸氫二銨、硫酸鎂、硫酸錳、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長因子，其成分還能抑制某些雜菌；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。MRS培養(yǎng)基的配制蛋...
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