BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒檢測(cè)蛋白濃度的原理及特點(diǎn)
堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物，測(cè)定其在562nm處的吸收值，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)比，即可計(jì)算待測(cè)蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測(cè)結(jié)果，但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類(lèi)的影響。實(shí)驗(yàn)中，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用考馬斯亮藍(lán)（Bradford）蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
BCA 法蛋白濃度檢測(cè)比考馬斯亮藍(lán)試劑要靈敏的多。操作簡(jiǎn)便，使用方便。
BAC蛋白濃度測(cè)定試劑盒的特點(diǎn)
1．步驟簡(jiǎn)單，45分鐘內(nèi)完成測(cè)定，比經(jīng)典的Lowry法快4倍而且更加方便。
2．靈敏度高，檢測(cè)濃度下限達(dá)到25μg/ml，小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5μg，待測(cè)樣品體積為1-20μl 。
3．BCA法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學(xué)物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達(dá)5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。
4．在20-2000μg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線(xiàn)性關(guān)系。
5. 檢測(cè)不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠(yuǎn)小于考馬斯亮藍(lán)法蛋白定量。
注意事項(xiàng)
1.長(zhǎng)期不用時(shí)，Cu試劑與PBS稀釋液可置于2-8℃保存，如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染則應(yīng)丟棄。BCA試劑在低溫條件下出現(xiàn)結(jié)晶沉淀時(shí)，可37℃溫育使其*溶解，不影響使用。
2.樣品中若含有較多干擾物質(zhì)時(shí)，請(qǐng)采用Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
3.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。