臺盼藍(lán)染色液使用說明書
貨號：C0040
規(guī)格：50ml、100ml
保存：4℃保存,一年有效。
產(chǎn)品簡介：
臺盼藍(lán)（Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍(lán)，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率，是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。 正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍(lán)，細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。
臺盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺盼藍(lán)染色后，通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較的定量。
染色時(shí)間只需 3-5 分鐘，操作簡單。
使用說明：
1. 收集細(xì)胞：
用胰酶和/或 EDTA 消化貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞可直接收集。收集的細(xì)胞時(shí)用 1000-2000 rpm 離心 1 分鐘，棄上清，制備單細(xì)胞懸液，并做適當(dāng)稀釋。
2. 臺盼藍(lán)染色：
細(xì)胞懸液與 0.4%臺盼藍(lán)溶液以 9:1 比例混勻（終濃度 0.04%），染色 3 分鐘 ( 染色 3 分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠，但染色時(shí)間可以更長一些，但不宜超過 10 分鐘) 。
3. 細(xì)胞計(jì)數(shù)：
吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大，無光澤；活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài)，有光澤。通常要比較地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品少數(shù) 500 個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞存活率（%）= 活細(xì)胞總數(shù)/（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×100%
注意事項(xiàng)：
1. 染色時(shí)間不能太長，否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色，使檢測結(jié)果偏低；
2. 有潛在致癌危險(xiǎn)，為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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