腫瘤標志物檢測的影響因素和質量控制
㈠ 分析前
1. 標本的采集。血液標本的正確采集和保存是腫瘤標志物測定結果準確的重要保證。如前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、 導尿和直腸鏡檢查后，血液 PSA 和PAP 值可升高；肝、腎功能異常和膽道排泄不暢、膽汁淤滯等均可造成腫瘤標志物如 CEA 、 ALP 、 GGT 、細胞因子等濃度增高；某些藥物會影響腫瘤標志物的濃度，如抗雄激素治療前列腺癌時可抑制 PSA 產生，導致PSA假陰性結果； 唾液和汗液污染標本可使SCC 升高。
由于紅細胞和血小板中也存在神經元特異性烯醇化酶（ NSE ），因此，樣本溶血可使血液中 NSE 濃度 增高。試管內的促凝劑，對某些項目的測定有干擾。
2. 標本的保存。血液標本采集后應及時離心，保存 於 4 ℃ 冰箱中， 24 小時內測定；如在短期內測定，則應 -20 ℃ 保存，長期保存應置-70 ℃ 冰箱 , 標本應防止反復凍融。酶類和激素類腫瘤標志物不穩(wěn)定，易降解，應及時測定或低溫保存。
㈡ 分析中
1. 測定方法和試劑對檢測結果的影響：
從方法學來看，腫瘤標志物測定方法很多，有放射免疫測定法，酶聯(lián)免疫測定法，化學發(fā)光免疫測定法等，每種測定方法有自己的精密度和重復性，但手工操作的方法重復性較差，誤差比較大，操作時要特別認真；用自動化儀器進行測定，重復性好，誤差小。

不同的試劑盒測定也有差異 ,其原因可能是由于使用的單克隆抗體針對抗原的位點不同所致。有時即使使用同一抗體，也可能因抗原異質性（如原發(fā)腫瘤轉移后，失去了原有的抗原性而停止分泌原有的腫瘤抗原）或基質的影響而得到不同的結果。有研究報道，使用12 種不同的 CEA 試劑盒檢測某一混合血清中 CEA 的濃度，結果其差異超過 100%。導致分析間誤差的主要原因是沒有測定的標準化，包括缺乏統(tǒng)一的抗原、抗原成分、校和參考方法等。因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進行測定。

2. “鉤狀效應”對檢測結果的影響： 腫瘤標志物的范圍常涵蓋幾個數量級，“鉤狀效應”可將高濃度結果錯誤報告為低濃度。酶聯(lián)免疫測定或免疫放射測定時，若待測樣本中抗原濃度過高，會出現(xiàn)高濃度后帶現(xiàn)象，即“鉤狀效應”（ hook effect），此時免疫反應被明顯抑制，出現(xiàn)錯誤的低值，要消除這種干擾，只有對樣本進行適當稀釋后重新測定。
3. 交叉污染對檢測結果的影響： 當測定很高濃度的標本時，交叉污染成為一個導致假陽性的潛在問題，所以應不時地復查有無標本被交叉污染。
4.嗜異性抗體對檢測結果的影響： 大多數腫瘤標志物的測定中常使用一對鼠單克隆抗體來與腫瘤抗原反應，如果病人血清中存在嗜異性抗體（特別是人抗鼠抗體），它可能在兩種鼠單克隆抗體間起“橋梁”作用，導致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤標志物濃度增高的假象。避免的辦法是在樣本中先加入提純的鼠 IgG，經溫育后，再用 PEG 沉淀鼠 IgG 和人抗鼠 IgG復合物，然后再進行測定。嗜異性抗體可出現(xiàn)在曾被鼠或寵物咬過的人，以及使用過動物免疫劑（如單克隆抗體）治療過的人。
5 腫瘤標志物檢測的質量控制
⑴ 檢測結果的重復性要求：常規(guī)腫瘤標志物測定的變異系數，批內 CV<5% ， 批間 CV<10% （ 期望值 ） 。
⑵ 室內質控標本的要求：室內質控應包括陰性和陽性低值和高值質控血清，要能涵蓋腫瘤標志物測定的范圍 。
⑶ 室內質控品要求：以血清為基質。
⑷ 室內質控圖：腫瘤標志物很少有參考方法，要堅持作室內質控圖，以均值為靶值，來判斷試驗的穩(wěn)定性和重復性。
㈢ 分析后：
1 ．參考值范圍， 不同標本如血液、尿液、胸、腹水等，必須有不同的參考值。不同地區(qū)、不同人群、不同方法、不同試劑和設備應建立自己的參考值范圍。
2 ．病人基礎 測定 值的變化， 對于結果的 分析極 有價值。故應監(jiān)測病人治療前、治療中和治療后各個階段腫瘤標志物含量 的變化，好畫一張腫瘤標志物含量的變化的曲線圖，以便綜合分析。
3 ．上升或下降 25 ％的臨床意義，一般病人的結果在排除檢測方法引起的誤差后，上升或下降 25 ％都有臨床價值。對于測定結果升高的標本必須復查，以防測定誤差。
4 ．加強與臨床的交流和溝通， 由于 腫瘤標志物測定其臨床意義的特殊性，必須加強與臨床的交流和溝通，當改變腫瘤標志物檢測方法和試劑時，必須通知臨床，否則會影響結果的判斷。建議醫(yī)師開化驗單時提供簡短的病人信息，如“手術后 ”“化療 3 次后 ” 等，這對解釋結果非常重要，還可幫助我們發(fā)現(xiàn)實驗室的偶然差錯。
5 ．必須知道腫瘤標志物的半壽期， 這有助解釋某些腫瘤標志物，如 AFP 和 hCG 的濃度變化，對于臨床判斷療效有重要意義。