原果膠含量檢測試劑盒

產(chǎn)品簡介：

儲存條件
2-8℃
中文名稱
原果膠含量檢測試劑盒
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Protopectin Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號：BC3680-50T/24S

更新時間：2024-04-15

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1047

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

原果膠含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號：BC3680

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液一	液體100 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
提取液二	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
提取液三	液體50 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體60 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
試劑二	液體3 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體5 mL×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1、提取液一：80%乙醇，自備。即將80 mL無水乙醇和20 mL蒸餾水混合。

2、試劑一：濃硫酸60 mL，自備。

3、標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg半乳糖醛酸，臨用前加入0.943 mL提取液三，配成50 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：

果膠是植物細(xì)胞壁主要組成成分之一，分為水溶性果膠和不溶性果膠，不溶性果膠為原果膠。原果膠是不溶于水的物質(zhì)，但可在酸、堿、鹽等化學(xué)試劑及酶的作用下，加水分解轉(zhuǎn)變成水溶性果膠，在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領(lǐng)域具有較廣泛的應(yīng)用。

原果膠在堿性條件下水解為可溶性果膠，并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為半乳糖醛酸，產(chǎn)物在強(qiáng)酸中與咔唑縮合生成紫紅色化合物，在530nm處有特征吸收峰。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、丙酮、濃硫酸、無水乙醇和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

取約0.1g樣本，加入1mL 提取液一，室溫快速勻漿，95℃水浴20min，冷卻至室溫，4000g 25℃離心10min，棄上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙酮交替各洗2遍（渦旋振蕩2min左右，4000g 25℃離心10min，棄上清即可），沉淀即為粗細(xì)胞壁，加入1mL提取液二（去除淀粉）浸泡15小時，4000g 25℃離心10min，棄上清，加入1mL提取液三，充分勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液待測。

二、測定步驟

1、分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至530nm，蒸餾水調(diào)零。

2、將50μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液用提取液三稀釋為0.7、0.6、0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

3、操作表：

試劑名稱	空白管	標(biāo)準(zhǔn)管	對照管	測定管
樣本（μL）	-	-	100	100
標(biāo)準(zhǔn)品（μL）	-	100	-	-
蒸餾水（μL）	100	-	-	-
試劑一（μL）	800	800	800	800
混勻、90℃放置10min，取出后冷卻
試劑二（μL）	-	-	100	-
試劑三（μL）	100	100	-	100
混勻，25℃靜置30min后測定530nm處吸光值，分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A對照管和A測定管。ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管，ΔA測定=A測定管-A對照管。

三、原果膠含量的計算

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以各個標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸，其對應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程得到x（μmol/mL）。

2、原果膠含量的計算：原果膠含量(μmol/g 質(zhì)量)=x×V提取液三÷W =x÷W

V提取液三：加入提取液三的體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g。

注意事項：

1、濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性，操作時需特別注意，90℃加熱取出后冷卻再打開蓋子，以防液體飛濺燒傷。

2、若ΔA超過0.6，可將樣本用提取液三進(jìn)行適當(dāng)稀釋再進(jìn)行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

實驗實例：

1. 取0.1g木槿加入1mL 提取液一，室溫快速勻漿，95℃水浴20min，冷卻至室溫，4000g 25℃離心10min，棄上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙酮交替各洗2遍（渦旋振蕩2min左右，4000g 25℃離心10min，棄上清即可），沉淀即為粗細(xì)胞壁，加入1mL提取液二浸泡15小時，4000g 25℃離心10min，棄上清，加入1mL提取液三，充分勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.194-0.044=0.15，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.9322x-0.0232，計算X=0.1858μmol/mL；按樣本質(zhì)量計算含量得：原果膠含量(μmol/g 質(zhì)量)= x÷W=1.858 μmol/g 質(zhì)量。