儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒微量法
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Amylopectin Content Assay Kit
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/96S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑，詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品型號(hào)：BC4275-100T/96S

更新時(shí)間：2024-04-15

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問(wèn) 量：997

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-微量法

水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)盒微量法生化試劑盒

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產(chǎn)品介紹

支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)
明書(shū)
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)：BC4275
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	液體110 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體100 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
試劑三	液體55 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四	-	2-8℃保存
試劑五	液體2 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑六	液體10mL×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：*100 mL自備。
試劑四：提供125 mL空瓶一個(gè)；將試劑三：H₂O =9 mL：91 mL混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，2-8℃保存半年。
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg支鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無(wú)水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的支鏈淀粉，2-8℃保存半年。

產(chǎn)品說(shuō)明：
支鏈淀粉又稱膠淀粉，一般由幾千個(gè)葡萄糖殘基組成，淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對(duì)淀粉產(chǎn)品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響。
支鏈淀粉和碘形成紅紫色絡(luò)合物，利用乙醇分開(kāi)樣本中的可溶性糖和淀粉，再用碘與其反應(yīng)得到支鏈淀粉含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0193 mg/mL
線性范圍：0.025-1 mg/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、天平、臺(tái)式離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、*、無(wú)水乙醇、EP管。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

稱取0.005g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；
80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測(cè)。

二、測(cè)定步驟

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)雙波長(zhǎng)至530nm和755nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：將10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液用試劑四稀釋至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。
標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表：

序號(hào)	稀釋前濃度（mg/mL）	標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL）	試劑四體積（µL）	稀釋后濃度（mg/mL）
1	10	100	900	1
2	1	160	40	0.8
3	1	120	80	0.6
4	1	160	240	0.4
5	0.4	200	200	0.2
6	0.2	200	200	0.1
7	0.1	200	200	0.05

備注：實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需40µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

操作表：(在1.5mL離心管中或96孔板中依次加入下列試劑)

試劑名稱	測(cè)定管	標(biāo)準(zhǔn)管	空白管
樣本（µL）	40	-	-
標(biāo)準(zhǔn)溶液（μL）	-	40	-
蒸餾水（µL）	-	-	40
試劑五（µL）	15	15	15
試劑六（µL）	10	10	10
蒸餾水（µL）	135	135	135
充分混勻，測(cè)定530nm和755nm處的吸光值，530nm下的測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管分別記為A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白，755nm下的分別記為A’測(cè)定、A’標(biāo)準(zhǔn)、A’空白，計(jì)算ΔA測(cè)定=（A測(cè)定-A空白）-（A’測(cè)定-A’空白），ΔA標(biāo)準(zhǔn)=（A標(biāo)準(zhǔn)-A空白）-（A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白）。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)定1-2次。

三、支鏈淀粉含量計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

以支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸（x，mg/mL），標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸（y，ΔA標(biāo)準(zhǔn)），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將ΔA測(cè)定帶入方程得到x（mg/mL）。

支鏈淀粉含量（mg/g 質(zhì)量）=x×V樣總÷W=5x÷W

V樣總：加入試劑四體積，5mL；W：樣本質(zhì)量，g。

注意事項(xiàng)：

反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測(cè)完成防止褪色。
如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.01g大米于研缽中研碎，加入1mL試劑一，進(jìn)行樣本處理，取上清3倍稀釋后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=（A測(cè)定-A空白）-（A’測(cè)定-A’空白）=（0.351-0.059）-（0.190-0.048）=0.150，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.5157x+0.0089計(jì)算x=0.2736，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：

支鏈淀粉含量（mg/g 質(zhì)量）=5x÷W×3（稀釋倍數(shù)）=410.4 mg/g質(zhì)量。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC2040/BC2045 β-淀*酶（β-AL）活性檢測(cè)試劑盒
BC0430/BC0435 ADPG焦磷酸化酶（AGP）活性檢測(cè)試劑盒
BC4255/BC4255 淀粉脫分支酶活性檢測(cè)試劑盒
BC4260/BC4265 直鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒

支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒微量法 支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒微量法

上一個(gè)：BC4270-50T/48S支鏈淀粉含量檢測(cè)試劑盒